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齐康网)c-myc基因是人类与肿瘤有密切关系的癌基因,在胃癌、肺癌、乳腺癌及白血病等肿瘤中均有显著表达
[1,2]。为探讨c-myc基因与视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)的关系,我们采用流式细胞技术及免疫荧光染色技术,对Rb组织中c-myc基因蛋白产物表达进行定量检测,并结合病理,对肿瘤浸润能力和肿瘤细胞增生能力进行分析,现报告如下。
一、材料与方法
1.材料来源:取本院病理科存档的石蜡组织标本31例,其中28例经病理证实为Rb,男13例,女15例;年龄6个月至6岁。正常眼外伤视网膜组织标本3例作对照。
2.病理学检查:经病理证实为Rb的28例中,肿瘤分化程度分为R0(组织中无菊形团)者15例,R1(仅有少量菊形团,每高倍镜少于5个)者11例,R2型(多数瘤细胞呈菊形团)者2例。分化程度依次由R0、R1至R2。肿瘤累及视神经者9例,未累及者19例。
3.流式细胞检测:(1)单细胞样品制备方法参见文献[2]。(2)采用间接免疫荧光标记法:一抗为c-myc单克隆抗体(美国Dako公司生产品),二抗为FITC-IgG单抗工作液(美国Dako公司生产品)。正常视网膜组织作对照,同时设阴性及阳性对照。(3)采用美国FACS420型流式细胞仪,测定前以鸡血红细胞作为标准样品,调整仪器的变异系数在5%以下。994
4.数据分析:
(1)荧光指数(fluorescence index,FI):表示c-myc基因产物的相对含量。公式:

当FI=1.00±0.05时为阴性表达,大于此值为阳性表达。
(2)肿瘤细胞增殖指数(proliferative index,PI):表示肿瘤细胞增殖能力。公式:

GO/G1期:DNA合成前期;S期:DNA合成期;G2M期:DNA合成后期和分裂期。
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